人熱休克蛋白60Hsp-60ELISA試劑盒經(jīng)過數(shù)年的努力已迅速成為集科研和生產(chǎn)為一體的專業(yè)化生物工程公司，公司將進(jìn)一步加強(qiáng)人才經(jīng)營、產(chǎn)品經(jīng)營，不斷提升企業(yè)的核心竟?fàn)幜?，?shí)現(xiàn)具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識(shí)化創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊(duì)的國際化的公司，服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域，迎接世界經(jīng)濟(jì)一體化所帶來的機(jī)遇與挑戰(zhàn)。

ELISA試劑盒的操作詳情：

1. 使用前，將所有試劑充分混勻，不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔，每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)，立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體，蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。

4. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干，重復(fù)此操作4次，如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干，重復(fù)此操作4次，如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘，避免光照。

8. 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

9. 在933nm波長處測(cè)定各孔的OD值。

該試劑盒組成包括：96孔酶標(biāo)板、酶標(biāo)二抗、四環(huán)素抗體工作液、四環(huán)素6個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液，底物顯色液、終止液、濃縮洗滌液、濃縮復(fù)溶液、高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液、蓋板膜、自封袋、說明書和質(zhì)檢報(bào)告，上海晶抗生物科技有限公司歡迎新老客戶前來訂購。

人熱休克蛋白60Hsp-60ELISA試劑盒

雙抗體夾心法：

1. 包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml，在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過液，次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘，（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。

2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)，然后洗滌，（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）。

3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml，37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號(hào)表示；也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。

◇ 洗滌方法：

1. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒，洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干，洗板5次。

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